檢測(cè)器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測(cè)的信號(hào)，常用檢測(cè)器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。
1.紫外可見(jiàn)吸收檢測(cè)器(ultraviolet－visibledetector，UVD)
紫外可見(jiàn)吸收檢測(cè)器(UVD)是HPLC中應(yīng)用zui廣泛的檢測(cè)器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測(cè)器。其特點(diǎn)是靈敏度較高，線(xiàn)性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對(duì)強(qiáng)吸收物質(zhì)檢測(cè)限可達(dá)1ng，檢測(cè)后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測(cè)器串聯(lián)使用。紫外可見(jiàn)檢測(cè)器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計(jì)相似，實(shí)際上就是裝有流動(dòng)地的紫外可見(jiàn)光度計(jì)。
用途：紫外檢測(cè)器使用于大部分常見(jiàn)具有紫外吸收有機(jī)物質(zhì)和部分無(wú)機(jī)物質(zhì)。紫外檢測(cè)器對(duì)占物質(zhì)總數(shù)約80%的有紫外吸收的物質(zhì)均可檢測(cè)，既可測(cè)190--350 nm范圍的光吸收變化，也可向可見(jiàn)光范圍350---700 nm 延伸。
紫外檢測(cè)器適用于有機(jī)分子具紫外或可見(jiàn)光吸收基團(tuán)，有較強(qiáng)的紫外或可見(jiàn)光吸收能力的物質(zhì)檢測(cè)。一般當(dāng)物質(zhì)在200-400 nm 有紫外吸收時(shí)，考慮用紫外檢測(cè)器。
優(yōu)點(diǎn)：紫外吸收檢測(cè)器不僅靈敏度高、噪音低、線(xiàn)性范圍寬、有較好的選擇性，而且對(duì)環(huán)境溫度、流動(dòng)相組成變化和流速波動(dòng)不太 敏感，因此既可用于等度洗脫，也可用于梯度洗脫。紫外檢測(cè)器對(duì)流速和溫度均不敏感，可于制備色譜。由于靈敏高，因此即使是那些光吸收小、消光系數(shù)低的物質(zhì) 也可用UV檢測(cè)器進(jìn)行微量分析。
不足之處在于對(duì)紫外吸收差的化合物如不含不飽和鍵的烴類(lèi)等靈敏度很低。
紫外可見(jiàn)吸收檢測(cè)器
(1)紫外吸收檢測(cè)器
紫外吸收檢測(cè)器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見(jiàn)區(qū)范圍的連續(xù)波長(zhǎng)，并安裝一個(gè)光柵型單色器，其波長(zhǎng)選擇范圍寬(190nm～800nm)。它有兩個(gè)流通池，一個(gè)作參比，一個(gè)作測(cè)量用，光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上，若兩流通池都通過(guò)純的均勻溶劑，則它們?cè)谧贤獠ㄩL(zhǎng)下幾乎無(wú)吸收，光電管上接受到的輻射強(qiáng)度相等，無(wú)信號(hào)輸出。當(dāng)組分進(jìn)入測(cè)量池時(shí)，吸收一定的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強(qiáng)度不等，這時(shí)有信號(hào)輸出，輸出信號(hào)大小與組分濃度有關(guān)。
局限：流動(dòng)相的選擇受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動(dòng)相，每種溶劑都有截止波長(zhǎng)，當(dāng)小于該截止波長(zhǎng)的紫外光通過(guò)溶劑時(shí)，溶劑的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收檢測(cè)器的工作波長(zhǎng)不能小于溶劑的截止波長(zhǎng)。
(2)光電二極管陣列檢測(cè)器(photodiodearraydetector，PDAD)
也稱(chēng)快速掃描紫外可見(jiàn)分光檢測(cè)器，是一種新型的光吸收式檢測(cè)器。它采用光電二極管陣列作為檢測(cè)元件，構(gòu)成多通道并行工作，同時(shí)檢測(cè)由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的全部波長(zhǎng)的光信號(hào)，然后對(duì)二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保留時(shí)間(tR)和波長(zhǎng)(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時(shí)觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)，從而迅速?zèng)Q定具有*選擇性和靈敏度的波長(zhǎng)。
單光束二極管陣列檢測(cè)器，光源發(fā)出的光先通過(guò)檢測(cè)池，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上，使所有波長(zhǎng)的光在接收器上同時(shí)被檢測(cè)。陣列式接收器上的光信號(hào)學(xué)的方法快速掃描提取出來(lái)，每幅圖象僅需要10ms，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)色譜流出峰的速度，因此可隨峰掃描。
2．熒光檢測(cè)器(fluorescencedetector，F(xiàn)D) 熒光檢測(cè)器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測(cè)器，可檢測(cè)能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過(guò)化學(xué)衍生化生成熒光衍生物，再進(jìn)行熒光檢測(cè)。其zui小檢測(cè)濃度可達(dá)0.1ng／ml，適用于痕量分析；一般情況下熒光檢測(cè)器的靈敏度比紫外檢測(cè)器約高2個(gè)數(shù)量級(jí)，但其線(xiàn)性范圍不如紫外檢測(cè)器寬。近年來(lái)，采用激光作為熒光檢測(cè)器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器極大地增強(qiáng)了熒光檢測(cè)的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。
熒光檢測(cè)器
特點(diǎn)：選擇性高，只對(duì)熒光物質(zhì)有響應(yīng)；靈敏度也高，zui低檢出限可達(dá)10-12ug/ml，適合于多環(huán)芳烴及各種熒光物質(zhì)的痕量分析。也可用于檢測(cè)不發(fā)熒光但經(jīng)化學(xué)反應(yīng)后可發(fā)熒光的物質(zhì)。如在酚類(lèi)分析中，多數(shù)酚類(lèi)不發(fā)熒光，為此先經(jīng)處理使其變?yōu)闊晒馕镔|(zhì)，而后進(jìn)行分析。
在線(xiàn)咨詢(xún)