安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作
1. 目的:明確安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作,確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
2. 范圍:適用于安捷倫液相色譜儀。
3. 職責(zé):檢驗(yàn)人員對此負(fù)責(zé)。
4. 操作規(guī)程:
4.1 系統(tǒng)組成
本系統(tǒng)由1個溶劑二元輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、手動進(jìn)樣閥、柱溫箱、檢測器、化學(xué)工作站和電腦等組成。
4.2 準(zhǔn)備
4.2.1使用前應(yīng)根據(jù)待檢樣品的檢驗(yàn)方法準(zhǔn)備所需的流動相,用合適的0.45μm濾膜過濾,超聲脫氣20min。
4.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的色譜柱(柱進(jìn)出口位置應(yīng)與流動相流向一致)和定量環(huán)。
4.2.3 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液(也可在平衡系統(tǒng)時配制),用合適的0.45μm濾膜過濾。
4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常
4.1 將待測樣品按要求前處理,準(zhǔn)備HPLC 所需流動相,檢查線路是否連接完好,廢液瓶是否夠用等。
4.3開機(jī):
4.3.1 打開計算機(jī),進(jìn)入中文Windows XP畫面,并運(yùn)行CAG Bootp Server程序。
4.3.2 打開 1200 LC 各模塊電源。
4.3.3 待各模塊自檢完成后,雙擊[Instrument 1 Online]圖標(biāo),化學(xué)工作站自動與1200LC
通訊,進(jìn)入的工作站畫面如下所示。
4.3.4 從[視圖]菜單中選擇[方法和運(yùn)行控制]畫面, 點(diǎn)擊[視圖]菜單中的[顯示頂部 工具欄], [ 顯示狀態(tài)工具欄],[系統(tǒng)視圖],[樣品視圖],使其命令前有[√]標(biāo)志,來調(diào)用所需的界面。
4.3.5 把流動相放入溶劑瓶中。
4.3.6 打開沖洗閥。
4.3.7 點(diǎn)擊[泵]圖標(biāo),點(diǎn)擊[設(shè)置泵…]選項(xiàng),進(jìn)入泵編輯畫面。
4.3.8 設(shè)流速:5ml/min,點(diǎn)擊[確定]。
4.3.9 點(diǎn)擊[泵] 圖標(biāo),點(diǎn)擊[控制…]選項(xiàng),選中[啟動],點(diǎn)擊[確定] ,則系統(tǒng)開始沖洗,直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續(xù)沖洗,直到所有要用通道無氣泡為止。
4.3.10 點(diǎn)擊[泵] 圖標(biāo),點(diǎn)擊[控制…]選項(xiàng),選中[關(guān)閉],點(diǎn)擊[確定]關(guān)泵, 關(guān)閉沖洗閥。
4.3.11 點(diǎn)擊[泵]圖標(biāo),點(diǎn)擊 [設(shè)置泵…選項(xiàng)],設(shè)流速:1.0ml/min。
4.3.12 點(diǎn)擊泵下面的瓶圖標(biāo),如下圖所示(以單元泵為例),輸入溶劑的實(shí)際體積和瓶體積。 也可輸入停泵的體積,點(diǎn)擊[確定]。
4.4 數(shù)據(jù)采集方法編輯
4.4.1開始編輯完整方法:從[方法]菜單中選擇[編輯完整方法…] 項(xiàng),如下圖所示選中除[數(shù)據(jù)分析 ]外的三項(xiàng),點(diǎn)擊[確定],進(jìn)入下一畫面。 4.4.2方法信息
4.4.2.1在[方法注釋]中加入方法的信息(如:測試方法)。 4.4.2.2 點(diǎn)擊 [確定], 進(jìn)入下一畫面。 4.4.3 泵參數(shù)設(shè)定
4.4.3.1 在[流速]處輸入流量,如1ml/min,在[溶劑 B]處輸入80.0,(A=100-B) ,也可[插入 ]一行[時間表] ,編輯梯度。在[壓力限]處輸入柱子的zui大耐高壓,以保護(hù)柱子。
4.4.3.2 點(diǎn)擊[確定],進(jìn)入下一畫面。
4.4.4 柱溫箱參數(shù)設(shè)定
4.4.4.1 在[溫度]下面的空白方框內(nèi)輸入所需溫度,如:40度。并選中它,點(diǎn)擊[更多>>] 鍵,如圖所示,選中[與左側(cè)相同],使柱溫箱的溫度左右一致。
4.4.4.2 點(diǎn)擊[確定],進(jìn)入下一畫面。
4.4.5 檢測器參數(shù)設(shè)定:檢測波長:一般選擇zui大吸收處的波長。樣品帶寬:一般選擇zui大吸收值一半處的整個寬度。參比波長:一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區(qū)域 。參比帶寬:至少要與樣品信號的帶寬相等,許多情況下用100nm作為缺省值。同時可以輸入采集光譜方式,步長,范圍,閾值。選中所用的燈。
4.4.6 在[ 運(yùn)行時選項(xiàng)表 ]中選中[ 數(shù)據(jù)采集],點(diǎn)擊[確定]。
4.4.7 點(diǎn)擊[方法]菜單,選中[方法另存為…],輸入一方法名,如[測試],點(diǎn)擊[確定]。
4.4.8 從菜單 [視圖]中選中[在線信號],選中[信號窗口1],然后點(diǎn)擊[改變…] 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點(diǎn)擊[確定]。(如同時檢測二個信號,則重復(fù)10,選中[信號窗口2]。
單擊[改變]鍵,即可彈出右側(cè)的[編輯信號圖譜]窗口,進(jìn)而選擇所需的譜圖信號。 4.4.9 從[運(yùn)行控制]菜單中選擇[樣品信息]選項(xiàng),如下圖所示,輸入操作者名稱,如[安裝工程師];在[數(shù)據(jù)文件 ]中選擇[手動]或[前綴/計數(shù)器]。區(qū)別: 手動--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉。 Pr—在前綴/計數(shù)器----[前綴]框中輸入前綴,在[計數(shù)器]框中輸入計數(shù)器的起始位,儀器會自動命名,如vwd數(shù)據(jù)0001,vwd數(shù)據(jù)0002……。
4.4.10 點(diǎn)擊[確定] ,從[儀器] 菜單選擇[系統(tǒng)開啟]。
4.4.11 等儀器準(zhǔn)備好,基線平穩(wěn),用試樣溶液清洗注射器,并排除氣泡后抽取適量。