吸附的主要原因
反相硅膠柱填充介質(固定相)與樣品間常常會發(fā)生下列吸附現(xiàn)象:
?。?) 殘存硅醇基與堿性物質間的離子吸附;(2) 硅膠表面的金屬雜質與金屬配位物質間的吸附;
(3) 疏水性*的物質在柱中的蓄積。以上現(xiàn)象,會引起反相色譜柱柱效下降、拖尾、重復性不良等狀況的發(fā)生
清洗方法
1、疏水性物質的去除:使用有機溶劑(乙腈、甲醇、乙腈與THF的混合溶劑)進行清洗。 考慮樣品成分對于有機溶劑的溶解性,選用比淋洗液濃度高的有機溶劑、或選用極性較低的有機溶劑進行過柱清洗。這種情況下,有必要注意淋洗液中鹽的析出現(xiàn)象。
2、堿性物質(金屬配位物質)的去除:使用酸性水溶液與有機溶劑的混合液(0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、甲醇的混合液)進行過柱清洗。
*一般來說,清洗時間可選擇為過柱5-10個柱體積便可。
在附吸成分其吸附力*時,即使進行過清洗,柱性能也有可能得
不到恢復。另外,請充分考慮淋洗液的pH值,以避免損壞色譜柱。