摘要：研究了紫外分光光度法測定果糖的方法果糖在鹽酸的作用下生成羥甲基糖醛，其zui大吸收波長在291nm．果糖濃度在0-30ug/ml范圍內(nèi)服從比爾定律。用
本法測定了蘋果汁、鴨梨汁和桔子汁中的果糖臺量
關(guān)鍵詞：分光光度法；果糖；測定
1 實驗部分
1.1試劑與儀器
1.1.1 果糖標(biāo)準(zhǔn)溶液
稱取0．1000gD一果糖(生化試劑)溶于二次蒸餾水，并定容到1000ml，果糖濃度為0.1000mg／ml；濃鹽酸(分析純)；所有實驗用水均為二次蒸餾水。
蘋果(產(chǎn)地陜西)，鴨梨(產(chǎn)地河北)，桔子(產(chǎn)地海南)單個果重約100～200g，均購于海南省五指山市農(nóng)貿(mào)市場.
1.1.2儀器：TU-1201紫外可見分光光度計(北京通用公司)．
1.2 實驗方法
在具塞比色管中加入適量的0．1000mg/ml的果糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入3ml濃鹽酸，用二次水定容到l0ml.在沸水中加熱8min，取出用流水冷卻．用1 cm比色皿，以試劑空白為參比，于波長291nm處測定其吸光度A．
將待測果實沿臍到葉柄方向縱向切成幾塊，用榨汁器擠出果汁，過濾，取濾液1ml，定容到1000 ml，制成待測液．按上述方法測定待測液．由待測溶液的吸光度計算出果汁的果糖含量。
2 結(jié)果與討論
2.1 吸收曲線
按實驗方法用紫外分光光度計進(jìn)行吸收光譜掃描，測出zui大吸收波長在291nm(見圖1)．當(dāng)果糖濃度增大時zui大吸收波長略有增加，本實驗選定291nm為吸收波長。
2.2 鹽酸的影響按實驗方法對不同
體積的濃鹽酸進(jìn)行試驗，結(jié)果表明，不加濃鹽酸時，吸光度A=0；當(dāng)鹽酸的加入量達(dá)3～4ml時，吸光度達(dá)到zui大值；繼續(xù)加入鹽酸，吸光度降低(見圖2)，鹽酸的用量以3ml為宜。
2.3 溫度及加熱時間的影響
對不同反應(yīng)溫度進(jìn)行試驗，結(jié)果表明，在100℃的水浴中加熱6min后，吸光度基本不變(見圖3)為使反應(yīng)充分，實驗選定加熱時問為8min。
2.4 放置時間對穩(wěn)定性的影響
用紫外分光光度計進(jìn)行60min的時間掃描，結(jié)果發(fā)現(xiàn)吸光度在40min內(nèi)有0.003的波動，40～60min內(nèi)吸光度逐漸增加0.004(見圖4)．實驗選在40min內(nèi)完成測定。
2.5工作曲線的繪制
吸取0.1000mg/ml的果糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml，按實驗方法測定吸光度，繪制工作曲線(見圖5)，可知呆糖含量在0.30ug／ml范圍內(nèi)服從比爾定律．其線性方程為：A=0.0306c+0.0151，相關(guān)系數(shù)r2=0.9983．對20ug／ml果糖進(jìn)行11次測定，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2 6％．
2.6 干擾物質(zhì)實驗
按照復(fù)驗方法進(jìn)行了干擾試驗，結(jié)果表明：抗壞血酸、可溶淀粉無干擾．葡萄糖濃度大于果糖濃度的5倍時，葡萄糖對果糖產(chǎn)生干擾(以誤差小于5％計)．蔗糖對本方法有較大干擾由于蔗糖在鹽酸中水解產(chǎn)生果糖和葡萄糖，在測定實際
樣品時，果糖測定值中含有蔗糖水解產(chǎn)生的果糖的量．
3 樣品分析
在上述實驗條件下，對蘋果汁、鴨梨汁和桔子汁待測液中的果糖含量進(jìn)行檢測，并進(jìn)行加標(biāo)試驗，各種果汁中的果糖含量的檢測結(jié)果列于表1，所測得的果糖含量為總果糖量(包括蔗糖在鹽酸中水解產(chǎn)生果糖)．從實驗結(jié)果可見該方法具有很好的選擇性和高的靈敏度，適用于組成較復(fù)雜的分析對象中的果糖含量測定。
在線咨詢